【研究分野】分析化学

【研究領域課題番号】16K14016 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

イメージング / 蛍光 / ルシフェラーゼ / 酵素 / 生細胞

【研究成果の概要】

特定の一細胞内酵素活性を絶対定量する技術開発を目的として，培養細胞内で遺伝子発現する発光タンパク質（ルシフェラーゼ）に焦点をあて，刺激を加えた時のルシフェラーゼの絶対定量法の確立を目指した．先ず，細胞内ミトコンドリアに局在するBakタンパク質に蛍光タンパク質（mEos3）を連結し，細胞外刺激に伴うBakクラスター形成を確認した．このクラスターに含まれるBak分子数を，mEos3の超解像蛍光イメージング技術を改良することにより計測可能にした．本計測は固定細胞のみならず，生細胞でも可能であることを立証した．mEos3の分子数から，ルシフェラーゼ1分子の活性を評価することが可能となる．

【研究種目】挑戦的萌芽研究

【研究期間】2016-04-01 - 2018-03-31

【配分額】3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)