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全能性に関するサイレントキーワード受精卵が含まれる科研費採択研究2件

全能性に関するサイレントキーワード受精卵が含まれる科研費採択研究 2件

母性mRNAの動員によるゲノムリプログラミングの調節機構について
【研究分野】統合動物科学
【研究領域課題番号】25252054 (KAKENデータベースで見る）
【研究キーワード】

リプログラミング / 母性mRNA / 1細胞期胚 / 卵 / 初期胚 / 未受精卵 / 全能性 / ゲノムリプログラミング / 母性RNA / 受精卵 / 卵母細胞
【研究成果の概要】

成長卵では翻訳されていないが、減数分裂の再開あるいは受精後にポリA鎖が伸長して翻訳が開始される母性mRNAが存在する。リプログラミング因子はこのような種類の母性mRNAから翻訳されるものと考え、ポリA鎖が伸長するmRNAを同定し、そのリプログラミングへの関与を明らかにすることを計画した。研究の成果として、まず、ポリA鎖が伸長した母性mRNAを高い精度で分別するシステムを構築した。次いで、分別したmRNAについてRNAシーケンスを行い、リプログラミング因子の候補を絞り込んだ。その後、CRISPER/Cas9システムを用いて候補因子のノックアウトを行うことでリプログラミングへの関与を調べた。
【研究代表者】

青木不学東京大学大学院新領域創成科学研究科教授 (Kakenデータベース)
【研究種目】基盤研究(A)
【研究期間】2013-10-21 - 2017-03-31
【配分額】44,330千円 (直接経費: 34,100千円、間接経費: 10,230千円)

iPS細胞誘導因子を用いた受精前後における全能性獲得機構の解明
【研究分野】基礎獣医学・基礎畜産学
【研究領域課題番号】22658091 (KAKENデータベースで見る）
【研究キーワード】

卵 / 初期胚 / リプログラミング / iPS細胞 / 山中因子 / 受精卵 / 全能性
【研究成果の概要】

まず、受精前後における4因子のmRNAの発現を調べたところ、すべての発現を検出できたが、Oct3/4とc-Mycの発現量が多いことが示唆されたため、まずこの2つの因子に着目して研究を行うことにした。
次いで、免疫染色法により、Oct3/4とc-Mycのタンパク質の局在を調べたところ、いずれも受精直後の1細胞期胚で核内への強い局在が認められた。
次いで、Oct3/4のsiRNAを作成し、これを成長卵に顕微注入して発現抑制を行ったところ、2細胞期への分裂が阻害され、1細胞期で発生を停止していた。
さらにこれらの胚では、1細胞期に発現する遺伝子の発現量が低下していることが明らかとなった。
【研究代表者】

青木不学東京大学大学院・新領域創成科学研究科教授 (Kakenデータベース)
【研究種目】挑戦的萌芽研究
【研究期間】2010 - 2011
【配分額】3,620千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 420千円)