【研究分野】産婦人科学

【研究領域課題番号】17K11268 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

ヒストンメチル化酵素 / 卵巣癌 / ChIP-seq / 実験ロボット / ヒストンメチル化 / WHSC1 / CHIP-seq / 卵巣明細胞癌 / エピジェネテックス / SMYD2 / エピゲノム治療薬 / 卵巣明細胞腺癌 / ChIPシークエンス法

【研究成果の概要】

卵巣癌の中で本邦に多く,薬剤耐性である卵巣明細胞癌 (Ovarian Clear Cell carcinoma : OCCC )においてヒストンメチル化酵素が治療標的となりうるかを検討した。卵巣明細胞癌組織において2種類のヒストンメチル化酵素(WHSC1,SMYD2)の発現亢進が認められた。WHSC1とSMYD2をノックダウンすると細胞増殖抑制が認められた。この事からWHSC1、SMYD2は卵巣明細胞癌の治療標的となりうることが示された。次に臨床検体に対応したロボティクス技術を利用した次世代型ChIP-seq法のプロトコール開発を行った。今後OCCC臨床検体を用いた大規模研究を行う予定である。

【研究の社会的意義】

ヒストンメチル化は癌治療のトピックにも関わらず、婦人科癌においては研究が進んでいない状況である。よってOCCCに対するヒストンメチル化酵素を標的とした新規エピゲノム創薬につなげる研究を行う事が目的であり、本研究において上記が達成されたと考える。また今までChIP-seq法は細胞株における解析が主な適応であったが、本研究で臨床検体を使用した次世代型ChIP-seq法を開発した。この解析法は本研究独自のものであり、今後この分野でリードできると考える。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2017-04-01 - 2020-03-31

【配分額】4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)

【研究分野】ウイルス学

【研究領域課題番号】16209016 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

エピジェネティクス / SWI / SNF複合体 / HIV / MLV / スプライシング / ジンサイレンシング / 再活性化 / 潜伏感染 / ジーンサイレンシング / レトロウイルス / レンチウイルス / p54nrb / RNA編集 / 転写後制御 / プロテオミクス / クロマチン構造変換因子 / ヒストンメチル化 / siRNA / 後転写制御

【研究成果の概要】

ポストゲノム時代を迎えた現代、エピジェネティクスの分子基盤を明らかにしてクロマチンの動態に基づいて感染機構を解明する必要がある。本研究では、レトロウイルスやレンチウイルスの初期感染、潜伏感染、再活性化に伴うウイルス遺伝子の発現の開始、維持、抑制と抑制解除の分子機構を、クロマチン動態、特にヒトにおける代表的なクロマチン構造変換因子SWI/SNF複合体を中心に置いて明らかにすることを目的としている。この3年間で以下の結果を得た。
1.MLVのLTRをもつレトロウイルスベクター及びtat非存在下のHIVベクターの安定な発現には、Brmが細胞内に存在することが必須であり、Bmの発現を欠くとstochasticで急速なgene silencingをおこすことが示された。また、このsilencingはintegration siteによっては、再活性化をしうることが示された。
2.プロテオーム解析により得られたSWI/SNF複合体に弱い親和性で結合するタンパク因子群の中でp54^<nrb>は、転写、スプライシング、さらにはRNA editingに関与することが知られる。またHIV RNAの特定配列と結合する活性をもつことも報告されている。これまでの解析の結果、Brmとp54は転写開始時にプロモーターに共局在し、その後も、コーディングDNAまたは転写産物の近傍にPSFタンパク質と共に存在し、スプライシングの過程に積極的に関与することが示唆された。実際Brm発現欠失細胞では選択的スプライシングを受ける遺伝子群の一部において、一部のexonを読みとばす傾向をもつことが示された。p54を含むSWI/SNF様複合体は転写開始から伸長に至るまで連続的に共局在して協調してスプライシングに関与するものと考えられる。HIVのスプライシングに対する影響を解析中である。

【研究種目】基盤研究(A)

【研究期間】2004 - 2006

【配分額】48,620千円 (直接経費: 37,400千円、間接経費: 11,220千円)