【研究分野】免疫学

【研究領域課題番号】15390164 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

記憶B細胞 / 辺縁帯B細胞 / ケモカイン受容体 / デコイ受容体 / 3940 / 細胞死 / Alternative Splicing / スフィンゴシン-1-リン酸 / 細胞死抵抗性 / inportinβ3 / PRMT6 / SMN exon7 / 変異マウス / 胚中心B細胞 / 長期生存抗体産生細胞 / アポトーシス

【研究成果の概要】

T細胞依存性抗原で刺激され活性化されたB細胞は胚中心を形成し、ここで高親和性記憶B細胞が産生される。産生された記憶B細胞は胚中心を離れ、長期の寿命を持って体内に維持され、二次免疫応答で迅速に抗体産生細胞に分化する。しかし、長期生存維持を司る分子機構は不明で、また、記憶B細胞の正確な組織局在やホーミングを司る分子は同定されていない。我々はこれまでに記憶B細胞で発現増強する遺伝子のクローニングを行ない、記憶B細胞で発現増強する多数の細胞内、細胞表面蛋白の遺伝子を同定した。解析の結果ヒト脊髄筋萎縮症の原因遺伝子であるSMN1遺伝子のマウスホモログが記憶B細胞及び胚中心B細胞に強発現し、試験管内で誘導されるアポトーシスを抑制する可能性が示唆された。更にSMN C末端領域はIgG1胚中心B細胞及び記憶B細胞の産生に必要であることが明らかにされた。また、獲得された遺伝子の解析から記憶B細胞がD6ケモカイン受容体を表面に発現することを明らかにし、記憶B細胞に高発現する新規遺伝子3940はERK6と相同性を有し、B細胞系列において記憶B細胞及び辺縁帯B細胞のみに高発現し、この遺伝子の発現が認められないB細胞株に強発現すると種々のアポトーシス培養条件下での細胞死に抵抗性を賦与されることを明らかにした。

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2003 - 2005

【配分額】15,000千円 (直接経費: 15,000千円)

【研究分野】病態検査学

【研究領域課題番号】10672174 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

血小板 / 好中球 / 凝集反応 / スフィンゴ脂質 / スティンゴシン / スフィンゴシン1-リン酸 / セラミド / アポトーシス / スフィンゴシン

【研究成果の概要】

1.好中球―血小板の接着・凝集反応における相互作用のFICによる解析
我々は,フローサイトメーターにCCDカメラ(画像撮影機能)を組み込んだフローイメージサイトメーター(Flow Imaging Cytometer:FIC)を開発している.FICは,前方散乱より得られる細胞の大きさに関する情報とデジタルカメラからの画像情報より,従来は困難であった血小板凝集塊と赤血球・白血球・単一血小板との鑑別を可能にした.このFICを用い,全血をADP・セロトニンなどの血小板アゴニストで刺激した際に,好中球・血小板の混合凝集塊を明瞭に観察できることを確認した.その定量評価が可能になるべく,種々の条件検討を重ねたが,現時点では確立できていない.装置の構成上,200枚の画像しか処理できず,FICによって検知できる混合凝集塊が絶対数として極めて低レベルであることが,主な理由である.将来的には,この混合凝集塊形成における,接着分子の関与を検討したい.
2.好中球をはじめとする各種血球・血管内皮細胞に対するスフィンゴ脂質の効果
我々は,活性化血小板からsphingosine 1-phosphate(Sph-1-P)が放出されること,スフィンゴ脂質の観点より血小板―各種血球・血管内皮細胞クロストークを考えることの重要性を報告してきた.好中球に対して,Sph-1-Pは明らかな作用を示さなかったが,ジ メチルスフィンゴ シン・Sph・セラミドは,この順で,好中球アポトーシスを誘導することを形態学的変化・フローサイトメトリー法にて確認した.血管内皮細胞では,Sph-1-P産生に対するSphキナーゼ阻害剤の効果の検討を行い,Sph-1-Pが血小板内セカンド・メッセンジャーとして作用しえないことを明らかにした.

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】1998 - 1999

【配分額】2,900千円 (直接経費: 2,900千円)