【研究領域課題番号】20K20594 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

アレルギー / クラススイッチ / IgA / 粘膜免疫 / 抗体

【研究成果の概要】

現在、アレルギーにおいては、まずTh2優位な状況がアレルギー病態のおおもとであると考えられている。なぜTh2優位であるかについては議論があるがよくわ かっていない。申請者はアレルゲンが体内に侵入することがその根本原因ではないか?と考えている。つまり、アレルギーの根本治療はアレルゲンの体内侵入を 減らすことであると考える。今回、申請者が提案する研究は、IgEを産生するための一連の免疫反応の流れをどこかで遮断するのではな く、アウトプットを横道にそらし(IgAへの選択的クラススイッチ誘導)、その結果としてIgE産生を減少させるだけでなくIgAによる粘膜防御を強固にすること でアレルゲンの侵入を減らし、反応のおおもとであるTh2優位な状況を是正しようという試みである。スギ花粉によるマウスアレルギーモデルにおいて、 Bryostatin 1の経鼻投与により、以下のアレルギー随伴症状の改善を昨年度確認した、
1、肺胞洗浄液中のIgE抗体価の減少、好酸球・リンパ球の減少
2、血清IgE抗体価の減少
3、鼻掻き様行動回数、くしゃみ回数の減少
加えて本年度は、予想通り、Bryostatin 1の経鼻投与により、縦隔リンパ節細胞によるThサイトカインの産生が有意に抑制されることも判明した。クラススイッチの変化の一因はBryostatin 1によりIgE遺伝子の転写活性が減少しIgA遺伝子の転写活性が増加すること、すなわちB細胞内の遺 伝子転写制御であることに加え、B細胞内のBryostatin 1による網羅的遺伝子発現変化も解析した。

【研究種目】挑戦的研究(開拓)

【研究期間】2020-07-30 - 2023-03-31

【配分額】25,870千円 (直接経費: 19,900千円、間接経費: 5,970千円)

【研究領域課題番号】18K19559 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

アレルギー / クラススイッチ / IgA / IgA抗体 / 抗体

【研究成果の概要】

私たちはアレルギーの新規治療薬候補として、IgEではなくIgAへ選択的にクラススイッチを誘導する化合物をスクリーニングにより得た。それらはプロテインキナーゼC(PKC)活性化剤であった。PKC活性化剤は一般的に発ガン性を有するが、我々は、発ガン性のないPKC活性化剤（Bryostatin1）を見出した。ダニ抗原によるマウスのアレルギーモデルにおいて、 Bryostatin1腹腔内投与により肺胞洗浄液と血清中のIgE抗体値の低下、肺胞洗浄液中の好酸球数などの減少、鼻掻き回数減少などアレルギー症状の改善を確認した。よってBryostatin1はアレルギーの根本的治療薬候補になると考える。

【研究の社会的意義】

私たちはアレルゲンが体内に侵入することがその根本原因ではないかと考えている。つまり、アレルギーの根本治療はアレルゲンの体内侵入を減らすことであると考える。一連の免疫反応の流れをどこかで遮断するのではなく、アウトプットを横道にそらし（IgAへの選択的クラススイッチ誘導）、その結果として粘膜防御を強固にすることでアレルゲンの侵入を減らし、一連の反応のおおもとであるTh2優位な状況をも是正しようという試みであり、今までのアレルギー治療にはなかった概念である。選択的IgAクラススイッチ誘導により、アレルゲンの侵入を減らすことから対症療法ではなくアレルギーの根本的治療となりうる。

【研究種目】挑戦的研究(萌芽)

【研究期間】2018-06-29 - 2020-03-31

【配分額】6,240千円 (直接経費: 4,800千円、間接経費: 1,440千円)

【研究分野】免疫学

【研究領域課題番号】20590490 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

抗体 / クラススイッチ / 体細胞突然変異 / AID / DNA組み換え / DNA組みかえ

【研究成果の概要】

Activation-induced cytidine deaminase (AID)は抗体遺伝子のクラススイッチに必須の遺伝子であり抗体遺伝子に傷を入れることはわかっているが、AIDの直接の標的は何か明らかではない。本研究ではAIDがクラススイッチを誘導する詳細な機序を明らかにするため、AID以外のcDNA(おそらくAIDの標的RNA由来)でAIDノックアウトB細胞のクラススイッチが回復されることを示し、AIDの標的をクローニングすることを目的とした。スクリーニングの結果、AIDの標的と思われる候補分子の情報を得たので、今後それらのクラススイッチへの寄与を検討する。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2008 - 2010

【配分額】4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)

【研究分野】免疫学

【研究領域課題番号】16590401 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

抗体 / AID / クラススイッチ / 体細胞突然変異 / B細胞免疫応答

【研究成果の概要】

抗体遺伝子のクラススイッチ(CSR)と体細胞突然変異(SHM)に必須の因子としてactivation-induced cytidine deaminase(AID)が単離されたが、いまだ分子レベルでの機序は明らかではない。SHMは抗体遺伝子の可変領域を標的としたDNA塩基置換であり、CSRは抗体遺伝子の定常領域のDNA配列を標的として、DNA2本鎖切断とその断端の結合による反応である。我々は、C末AID変異体により特異的にCSRだけが障害されることをすでに報告した。さらに、昨年度、研究代表者は、N末AID変異体がSHMだけを特異的に障害することを見つけた。これらの変異はAIDの活性中心と考えられているcytidine deaminase motifには存在しないことから、N末あるいはC末にそれぞれ特異的に結合するcofactorが存在し、変異により各cofactorがAIDに結合できず、CSRあるいはSHMが障害されると予想される。つまり、可変領域を標的とするSHMにはN末に結合するcofactor、定常領域を標的とするCSRにはC末に結合するcofactorがそれぞれ必要で、cofactorを介してCSRとSHMという二つの反応が、標的遺伝子特異的に制御されているのではないかと推察された。
現在、C末AID変異体およびN末AID変異体のノックインマウスを作製中で、今後in vivoにおけるこれらのAID変異体の機能を解析したい。
また、現在大きな論争となっているAIDのtargetはDNAかRNAか、という疑問に答えるために、野生型AIDとAID変異体の蛋白を精製して、DNAあるいはRNAに対するcytidine deaminase活性を測定するための実験系を構築中である。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2004 - 2005

【配分額】3,600千円 (直接経費: 3,600千円)