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βアミロイド / ドーパ産生神経細胞 / イヌ / 中脳黒質 / レビー小体 / 加齢 / 神経細胞 / 神経細胞内封入体 / 神経細胞死 / 神経細胞アポトーシス

本研究期間において、イヌの大脳、海馬、中脳の神経細胞についてβアミロイド沈着の有無、ssDNA抗体によるアポトーシス細胞数、ユビキチン抗体による変性神経突起数、GFAP抗体により星状膠細胞増殖率等を検索し数値化すると同時に、これらの部位における神経細胞の基本的な病理学的変化をしらべた。中脳については、特に黒質領域の病変を限定して検索する目的で、チロシンヒドロキシラーゼ(TH)に対する抗体を用いて黒質のドパミン生成神経細胞を描出して、加齢に伴う同細胞数の変化等もあわせて検討した。その結果、大脳では神経細胞の減少・神経膠細胞の増加が比較的年齢依存性にみとめられるのに対し中脳黒質のドパミン生成神経細胞数は加齢やβアミロイド沈着による影響は殆ど受けずに、良好に維持されており、ssDNAで描出されるアポトーシス細胞も加齢依存性に増加する傾向も見られなかった。一方中脳黒質では大脳や海馬の神経細胞では、認められない好塩基性あるいは好酸性結晶状封入体が老齢犬を中心に頻繁に観察されることが明らかになった。ヒトのパーキンソン病では、中脳黒質のドパミン生成細胞にレビー小体と呼ばれる細胞質内封入体が形成され、本封入体の形成にはαシヌクレインの凝集が関与すると考えられている。このため高齢犬黒質神経細胞内の封入体の構成成分を明らかにする目的で、αシヌクレイン、ユビキチン、ニューロフィラメント、チュブリン等に対する抗体を用いて検索したところ、一部の封入体がユビキチンに陽性を示すものの、その他の抗体との反応は認められなかった。このためイヌ黒質神経細胞に形成される封入体はヒトのレビー小体と異なる機序で形成され、神経細胞死を誘発するほどの病理学的意義に乏しい変化であろうと予想された。しかしながら、高齢犬の黒質神経網には、抗ユビキチン抗体で描出される変性神経突起が加齢依存性に有意に増加することが本研究で明らかにされており、このような神経突起変性に神経細胞内の封入体形成が関与する可能性は否定できない。以上の研究成果については、既に昨年学術論文として取りまとめ本年2月に学術雑誌(J.Vet.Med.Sci.)に公開される。

アミロイドβタンパク / イヌ / アポトーシス / 中脳黒質 / レビー小体 / 神経疾患 / 神経神経疾患 / 老人斑 / 神経細胞死 / 神経細胞内封入体 / βアミロイドタンパク / 痴呆 / αシヌクリン / ユビキチン / 加齢 / アミロイドβ前駆タンパク / 脳血管アミロイド症 / 動物

平成14年度は本研究の最終年度にあたり、前年度までに実施された研究の取りまとめを中心に行った。平成13年度から14年度にかけ実施した研究のうち、イヌの中脳黒質の加齢性病変について論文として公表した(J.Vet.Med.Sci.2003,65,Vol.2 In press.)。本研究では、チロシンヒドロキシラーゼ(TH)に対する抗体を用いて黒質のドパミン生成神経細胞を描出し、同部の加齢性変化を検討した。大脳では神経細胞の減少・神経膠細胞の増加が比較的年齢依存性にみとめられるのに対し、ドパミン生成神経細胞数は、加齢やβアミロイド沈着による影響は受けずに良好に維持され、ssDNA陽性アポトーシス細胞も増加する傾向はなかった。また黒質では好塩基性あるいは好酸性結晶状封入体が老齢犬に頻繋に観察された。しかしながら、これらの封入体はパーキンソン病のレビー小体と異なる機序で形成され、神経細胞死を誘発しない変化であろうと予想された。しかしながら、高齢犬の黒質神経網には、抗ユビキチン抗体で描出される変性神経突起が加齢依存性に有意に増加することが同時に明らかにされ神経細胞内の封入体形成がこの変化に関与する可能性も考えられた。
これら直接の研究成果の他に、本研究の一貫として収集された、動物の様々な自然発生中枢神経系疾患についても病理学的検討が加えられ、イヌの中枢神経系腫瘍(J.Vet.Med.Sci.2002,64,Vol.2,2003,65.Vol.1.Vol.2)や抗コリンエステラーゼ抗体が関与すると考えられる重症筋無力症など(J.Vet.Med.Sci.2002.64.Vol.7)、今後の動物神経系疾患の研究に有用と思われる情報が収集され、それぞれの内容について学術雑誌に公表した。未公表のデータについても来年度中に学術雑誌に公開する予定であるが、本研究報告書にはその内容を明記した。

【研究分担者】
内田和幸	宮崎大学	農学部	助手	(Kakenデータベース)
池田正浩	宮崎大学	農学部	助教授	(Kakenデータベース)